萬級無菌室及微生物實(shí)驗(yàn)室選址及裝修工程案例

萬級無菌室及微生物實(shí)驗(yàn)室裝修工程等項(xiàng)目主要應(yīng)用于微生物制品,、保健品,、制藥,、檢測機(jī)構(gòu),、研發(fā)等特殊行業(yè),。無菌室工程設(shè)計(jì)規(guī)劃對空氣潔凈度、溫濕度,、梯度壓差,、微生物控制、新風(fēng)等要求都比較嚴(yán)格,。我們的用戶群包括：生物,、微生物研究所、姿采化妝品,、醫(yī)藥,、拜迪生物等知名企業(yè)，無菌實(shí)驗(yàn)室,、微檢室,、生物安全實(shí)驗(yàn)室等領(lǐng)域有豐富的設(shè)計(jì)建造經(jīng)驗(yàn)。

一,、微生物實(shí)驗(yàn)室選址：
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選擇在清潔安靜的場所,，遠(yuǎn)離生活區(qū)，鍋爐房與交通要道,；實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選擇在光線充足,，通風(fēng)良好的場所，要與生產(chǎn)加工車間有一定距離,；實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選擇在方便扦樣與檢驗(yàn),，距離車間較近的工作場所。
二,、結(jié)構(gòu)和布局：
根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際需要,，一般工廠應(yīng)設(shè)置細(xì)菌與理化檢驗(yàn)兼有的綜合實(shí)驗(yàn)室，主要包括以下三大部分：細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室,、理化實(shí)驗(yàn)室,、辦公室。
1. 辦公室
理化分析實(shí)驗(yàn)室：（或者和細(xì)菌檢驗(yàn)操作室合并）
①理化分析室（兼作感觀檢驗(yàn)室）
②儀器室（兼放細(xì)菌室顯微鏡等少量儀器）
細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室：
①細(xì)菌檢驗(yàn)操作室,；
②無菌室,；
③培養(yǎng)基制作室；
④洗滌消毒室,；
一般布局要求如下：
1. 辦公室：辦公室是化驗(yàn)人員進(jìn)行原始記錄等各項(xiàng)工作的場所,，是與非化驗(yàn)室人員交往較多的場所,，因此，應(yīng)設(shè)在整體綜合化驗(yàn)室的最外層,，只需有桌,、椅等簡單設(shè)施即可。
2. 細(xì)菌檢驗(yàn)操作室（常規(guī)操作）細(xì)菌檢驗(yàn)操作室是細(xì)菌培養(yǎng)與檢驗(yàn)主要操作室,，主要設(shè)施是實(shí)驗(yàn)臺,。
對實(shí)驗(yàn)臺的要求：
a.實(shí)驗(yàn)臺面積一般不小于2.4×1.3m；
b.實(shí)驗(yàn)臺位置應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室中心位置,，要有充足光線,；也可以做邊臺。
c.實(shí)驗(yàn)臺兩側(cè)安裝小盆與水龍頭,；
d.實(shí)驗(yàn)臺中間設(shè)置試劑架,，架上裝有日光燈與插座；
e.實(shí)驗(yàn)臺材料要以耐熱,、耐酸堿為宜,。
3. 無菌室：無菌室通過空氣的凈化和空間的消毒為微生物實(shí)驗(yàn)提供一個相對無菌的工作環(huán)境，無菌室是處理樣品和接種培養(yǎng)的主要工作間,，應(yīng)與細(xì)菌檢驗(yàn)操作室緊密相連,。為滿足無菌室無菌要求，無菌間應(yīng)滿足以下布局：
入口避開走廊,，設(shè)在細(xì)菌檢驗(yàn)操作室內(nèi),；
b.與操作室用兩道緩沖間隔開；
c.無菌室與緩沖間均裝有紫外燈,，要求每3平米安裝30ｗ紫外燈一盞,；
d.無菌室內(nèi)設(shè)有實(shí)驗(yàn)臺中央（實(shí)驗(yàn)臺與邊臺皆可），紫外燈距實(shí)驗(yàn)臺面要小于1.5m,；
e.無菌室與操作室之間設(shè)有雙層窗構(gòu)成小通道,。
4. 培養(yǎng)基制作室：培養(yǎng)基室是制作、配制微生物培養(yǎng)所需培養(yǎng)基及檢驗(yàn)用試劑的場所,，其主要設(shè)備應(yīng)為邊臺與藥品柜,。
a.邊臺上要放置電爐，以滿足熔化煮沸培養(yǎng)基時用,；
b.邊臺材料要耐高熱,、耐酸堿；
c.藥品柜分門別類存放一些一般藥品及試劑,；
d.危險,、易腐易燃有毒有害藥品單獨(dú)設(shè)保險柜存放；
e.邊臺上要放天平,，以稱取藥品用,。
5. 洗滌消毒室：洗滌消毒室用以消毒洗滌待用與已用之玻璃器皿,，培養(yǎng)基及污物,，其面積應(yīng)大于10m2 ,。
為滿足洗滌消毒的功能，洗滌消毒室應(yīng)設(shè)有：
a.1-2個洗滌池,，洗滌池上下水網(wǎng)要暢通,；
b.器皿柜或?qū)嶒?yàn)臺，以放置洗滌好器皿,；
c.高壓滅菌鍋,，其所用電源應(yīng)滿足用電負(fù)荷；
d.室內(nèi)安有通風(fēng)裝置（通風(fēng)柜）或換氣扇,；
e.有條件的單位還可在該室內(nèi),，設(shè)供日常檢驗(yàn)用水蒸餾水器裝置。
6. 理化分析室：（如果沒有條件,，這個可以和微生物常規(guī)實(shí)驗(yàn)室合并）理化分析室是物理化學(xué)分析的主要操作室,。
a.實(shí)驗(yàn)臺與細(xì)菌操作室要求相同
b.設(shè)置通風(fēng)柜以滿足加熱、消化,、干燥,、燒灼和化學(xué)處理等工作需要；
c.洗滌池,。
7. 儀器室：如果沒有條件,，這個可以和微生物常規(guī)實(shí)驗(yàn)室合并，用以放置顯微鏡,、電子天平及理化分析用小型儀器,；
要求清潔干燥、防潮防蟲,、避光,；
b.儀器臺要穩(wěn)固、牢靠,。
對于小的企業(yè)實(shí)驗(yàn)室,，如果沒有更多的房間進(jìn)行區(qū)分，應(yīng)該可以通過規(guī)劃房間分區(qū),，以保證實(shí)驗(yàn)室不同工作區(qū)（潔凈區(qū)和一般操作區(qū)）之間有一定區(qū)分,因此,，最少應(yīng)保證4個房間或者4個分區(qū)。
1．洗刷消毒區(qū)域,，這個區(qū)域要求相對獨(dú)立,，最好以房間間隔，因?yàn)檫@個區(qū)域處理廢物,，有一定的污染和濕度,。
2．培養(yǎng)基配制區(qū)域,，用于培養(yǎng)基的配制，經(jīng)常有水等,，需要相對獨(dú)立一些,。
一般操作區(qū)域，這個是主要操作區(qū)域,，微生物的試驗(yàn)結(jié)果的觀察,，顯微鏡操作，一般的簡單理化操作,，儀器設(shè)備等,，都可以合并在這個房間或者區(qū)域進(jìn)行。
無菌操作區(qū)域,，無菌間,，這個要求獨(dú)立。
微生物實(shí)驗(yàn)室分區(qū)及基本要求
良好的自然通風(fēng),，必要時應(yīng)配備抽風(fēng)機(jī),。接種、分離及鑒定細(xì)菌等操作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行,，對結(jié)核桿菌等傳染性極強(qiáng)的微生物學(xué)檢驗(yàn)時必須在100 ％外臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室接觸多種有害微生物,，為了防止交叉污染，保護(hù)工作人員健康,，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)至少劃分成3個區(qū),。

一、清潔區(qū)
包括辦公室,、休息室,、培養(yǎng)基配制室與試劑儲藏室。此區(qū)域禁止帶人細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本,。
二,、操作區(qū)
（1）整潔：微生物操作區(qū)是各種病原菌相對集中的地方，為了減少粉塵流動,，防止交叉污染,，操作區(qū)應(yīng)與外界分開。實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)入操作區(qū)應(yīng)換鞋,，送標(biāo)本人員不進(jìn)入操作區(qū),，操作區(qū)地面用專用拖把每天拖1 次，每周用消毒劑擦洗1 次,。每天早上工作前,，用紫外線照射30 min ，或每天工作后,，用紫外線照射60 min ,，對整個操作區(qū)進(jìn)行消毒,；下午工作結(jié)束后用消毒液消毒工作臺面，以保證工作環(huán)境的安全清潔,。
（2）光線：細(xì)菌培養(yǎng)的細(xì)小菌落及血清試驗(yàn)?zāi)w粒的觀察,， 都需要有充足的光線。操作區(qū)除設(shè)置常規(guī)照明燈外,，還必須安裝操作臺燈,，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確判斷。

（3） 通風(fēng)：由于各種病原菌集中,，空氣污濁，實(shí)驗(yàn)室要求保持排的生物安全柜中進(jìn)行,。
（4）溫度和濕度：由于無菌操作的要求,，實(shí)驗(yàn)過程中經(jīng)常使用酒精燈，因此,，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室不能安裝吊扇,。為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需的適宜溫度，尤其是滿足某些儀器對溫度濕度的要求,，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝空調(diào),。
（5）電源：要求提供穩(wěn)壓、恒頻的電源,；根據(jù)儀器設(shè)備要求,，必要時配備不間斷電源。
（6）水源：操作區(qū)內(nèi)須設(shè)置水源,。用于標(biāo)本處理（如細(xì)菌染色） 的水槽與工作人員洗手用的水槽不能混用,。
（7）污染物處理：操作區(qū)須備有消毒缸，以處理沾有活菌的玻片等污染物品,。檢驗(yàn)剩余的標(biāo)本及使用過的帶菌平板,、試管均須集中地點(diǎn)安全放置，經(jīng)消毒滅菌處理后再洗滌或丟棄,。
三,、無菌區(qū)
（1）無菌室應(yīng)完全封閉，進(jìn)出無菌室至少要經(jīng)兩道門,，中間隔有緩沖間,，無菌室與外間設(shè)置一個可開閉的窗口，用于傳遞器具,。
（2）無菌室必須保持整潔,。工作人員進(jìn)入無菌室應(yīng)換專用鞋、專用衣,。無菌室使用前須用紫外線消毒30 min ,，操作結(jié)束后清潔臺面,，再用紫外線消毒30 min 。定期用乳酸或甲醛熏蒸,，徹底消毒,。
（3）無菌室僅用于培養(yǎng)基分裝等無菌操作，不能進(jìn)行有菌標(biāo)本的操作,。操作人員操作時應(yīng)嚴(yán)格關(guān)門,，并戴好專用的口罩、帽子,。
（4）無菌室內(nèi)應(yīng)有空氣過濾裝置,，并安裝空調(diào)。
食品微生物實(shí)驗(yàn)室必備設(shè)備
一,、無菌室和超凈工作臺
是實(shí)驗(yàn)室的核心部分,，主要為樣品提供保護(hù)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確和人員的安全,。
（一）無菌室
無菌室通過空氣的凈化和空間的消毒為微生物實(shí)驗(yàn)提供一個相對無菌的工作環(huán)境,。無菌室的主要組成設(shè)備的空氣自凈器，傳遞窗,，紫外線燈等,。嚴(yán)格的無菌室可能還裝備風(fēng)彬室等。
（二）超凈工作臺
超凈工作臺作為代替無菌室的一種設(shè)備,，使用簡單方便,，為實(shí)驗(yàn)的開展提供一個相對無菌的操作臺。超凈工作臺灣隊(duì)根據(jù)風(fēng)向分為水平式和垂直式,。
二,、培養(yǎng)箱
主要用于實(shí)驗(yàn)室微生物的培養(yǎng)，為微生物的生長提供一個適宜的環(huán)境,。
（一）普通培養(yǎng)箱：一般控制的溫度范圍為：室溫＋５～６５度,，又分為電熱恒溫培養(yǎng)箱和隔水式恒溫培養(yǎng)箱。
（二）生化培養(yǎng)箱：一般控制的溫度范圍為：５～５０度,。
（三）恒溫恒濕箱：一般控制的溫度范圍為：５～５０度,，控制的濕度范圍為：５０～９０％?？勺鳛槊咕囵B(yǎng)箱,。
（四）厭氧培養(yǎng)箱：適用于厭氧微生物的培養(yǎng)。
三,、電熱干燥箱：用于吸管,，平皿類玻璃器皿的干熱、滅菌和烘烤。
四,、高壓蒸汽滅菌器（又叫高壓滅菌鍋）：物品的滅菌,。
五、天平：一般要求具備精度達(dá)到萬分之一的分析天平,。
六,、顯微鏡：觀察細(xì)菌形態(tài)和動力、微生物和微小物品結(jié)構(gòu)的必備儀器,。
七,、分光光度計(jì)：在ＱＳ中用于生產(chǎn)方便面，茶飲料,，肉制品,，乳制品，棉白糖的企業(yè),。
八,、酸度計(jì)：在ＱＳ中用于生產(chǎn)果蔬罐頭，白沙糖,，飲用水類的企業(yè)。
九,、電導(dǎo)率儀和濁度儀:在ＱＳ中用于生產(chǎn)飲用水的企業(yè),。
十、折光儀:在ＱＳ中用于生產(chǎn)果蔬罐頭,，飲料類的企業(yè),。
十一、恒溫水溫浴鍋:在ＱＳ中用于部分培養(yǎng)溫度需要水?。ㄈ绱竽c桿菌檢驗(yàn)）生產(chǎn)方便面,，速凍面米食品企業(yè)。
十二,、定氮裝置:在ＱＳ中用于生產(chǎn)乳制品,，含蛋白質(zhì)飲料的企業(yè)。
雜質(zhì)度過濾機(jī):在ＱＳ中用于生產(chǎn)乳品企業(yè),。
均質(zhì)器：用于均質(zhì)樣品,，有旋轉(zhuǎn)刀片式和拍擊式可以選擇。
冰箱
常規(guī)玻璃器皿
一,、 吸管：用于吸取少量液體,，常用的吸管為0.1刻度1mL及1.0刻度的10mL吸管。
二,、培養(yǎng)皿：為硬質(zhì)玻璃雙碟,，常用于分離培養(yǎng)，蓋與底大小應(yīng)合適，常用規(guī)格為90mm,。
三,、三角燒瓶與廣口瓶：多用于盛培養(yǎng)基及配制溶液，常用的規(guī)格有250mL,、500mL,、1000mL。
四,、燒杯：供盛液或煮沸用,，常用的規(guī)格為100mL、250mL,、500mL,、1000mL
五、量筒：用于液體測量,，常用規(guī)格為100mL,、250mL、1000mL
六,、試管：用于細(xì)菌培養(yǎng),，有多種規(guī)格。
七,、載玻片蓋玻片：細(xì)菌涂片觀察用,。
八、試劑瓶：裝試劑用,，常用棕色避光

九,、其它，如試管架,、毛刷,、酒精燈、接種針,、接種環(huán)等
實(shí)驗(yàn)室配套常用設(shè)備
一,、通風(fēng)柜
二、離心機(jī)
三,、純水器
四,、烘箱
五、低溫冰箱實(shí)驗(yàn)室常用消耗品(凈化工作臺)

六,、其他
（一）實(shí)驗(yàn)室耗材（槍頭）,、振蕩器、菌落計(jì)數(shù)器,、電位 pH計(jì),、高速離心機(jī),、離心管、試管,、巴氏吸管,、槍頭盒、培養(yǎng)皿,、細(xì)胞培養(yǎng)板,、酶標(biāo)版、過濾器,、移液管,、接種環(huán)、接種針,、比色皿,、培養(yǎng)板、PCR管,、量筒燒杯,。

（二）常用設(shè)備，如鐵架臺,、升降臺,、滴定臺、鑷子,、攪拌子,、各種刷子、藥勺,、濾紙、三腳架,、支架,，等等。
五,、化學(xué)試劑和培養(yǎng)基
化學(xué)試劑和培養(yǎng)基：參照所執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)后面的附錄購買所需試劑和培養(yǎng)基,，目前所用多為合成干粉培養(yǎng)基，試劑也可以購買到標(biāo)準(zhǔn)配套試劑,。
實(shí)驗(yàn)室配套常用試劑
營養(yǎng)瓊脂,，乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基，乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基,，伊紅美藍(lán)瓊脂等,。

微生物實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)備的質(zhì)控要求
(1）孵箱：根據(jù)需要設(shè)置溫度，可調(diào)溫度范圍應(yīng)由室溫至60℃,。孵箱溫度允許的波動幅度為設(shè)置溫度±1℃,，如一般細(xì)菌培養(yǎng)，孵箱溫度應(yīng)為35℃±1℃。應(yīng)每天記錄孵箱溫度,，定期加水,，每月清潔內(nèi)壁和架子。
（2）冰箱和低溫冰箱：普通冰箱允許溫度為4℃±2℃,，每天記錄溫度,，并定期清潔。盡量減少冰箱開啟次數(shù),，減少溫度的波動,。低溫冰箱控制溫度－20℃±5℃，每天觀察溫度并記錄,，每隔3個月除霜1次,。一旦溫度失控，及時調(diào)整,。

（3）水浴箱：根據(jù)需要設(shè)置溫度,，允許的溫度波動幅度為0.5℃，每日檢查水位,，記錄溫度,。每月擦拭箱體內(nèi)部并換水。

（4）高壓滅菌器：控制溫度121℃,，每次使用前觀察并調(diào)整水位,，記錄使用時間、溫度或壓力,。每周用嗜熱芽孢桿菌檢測滅菌效果,，每月清理內(nèi)部及換水，并定期檢測密封圈的密封效果,。

（5）二氧化碳培養(yǎng)設(shè)備：常用的有二氧化碳箱和蠟燭罐,，要求二氧化碳濃度為5％～10％，箱內(nèi)或罐內(nèi)保持濕度,，并用淋病奈瑟菌作培養(yǎng)效果監(jiān)測,。

（6）厭氧培養(yǎng)設(shè)備：主要有厭氧箱、厭氧罐,、厭氧袋,。混合氣體組分要求二氧化碳10％,、氫氣10％和氮?dú)?0％,。厭氧箱與厭氧罐內(nèi)部要每周清潔，定期更換催化劑,。每次使用培養(yǎng)設(shè)備均應(yīng)用美藍(lán)指示劑或銅綠假單胞菌檢測厭氧效果,。
（7）天平：保持刀刃光滑而鋒利,、稱盤清潔，并定期校正,。

（8）pH計(jì)：要求誤差不超過0.02,，并定期校正。

（9）顯微鏡：最常用的是光學(xué)顯微鏡,，應(yīng)注意保護(hù)油鏡,。每次使用后應(yīng)用擦鏡紙擦去油鏡頭上的鏡油。每天工作結(jié)束后,，應(yīng)用含少量（或酒精）的擦鏡紙擦拭油鏡,，再用潔凈擦鏡紙擦干。另外,，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室還用到暗視野顯微鏡,、熒光顯微鏡等，均應(yīng)按規(guī)程清潔和保養(yǎng),。

（10）玻璃器皿：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室所用試管,、吸管、平皿等應(yīng)潔凈無菌,，不殘留酸堿,。

（11）接種器具：分為接種針和接種環(huán)兩種。應(yīng)選用傳熱散熱快,、耐用和不生銹的材料,，早先使用的白金絲由于價格昂貴，目前多用比較經(jīng)濟(jì)的鎳鉻絲代替,。一般要求接種環(huán)長5～8cm,、直徑2～4mm，定量接種環(huán)要定期校正其容量,，接種針長5～8cm,。

設(shè)備控制標(biāo)準(zhǔn)保養(yǎng)及監(jiān)測
高壓滅菌器溫度≥121℃每次用前換水；每月清潔1次,。
孵育箱溫度35℃±1℃每天記錄溫度；每月清潔內(nèi)壁和隔板,。
水浴箱溫度37 ℃±0.5℃每天記錄溫度,；每月擦內(nèi)壁和換水。
冰箱溫度4℃±2℃每天記錄溫度,；保持清潔并定期除霜,。
低溫冰箱溫度－20℃±5℃每天記錄溫度；保持清潔并定期除霜,。
二氧化碳培養(yǎng)箱:二氧化碳5％～10％,每天記錄溫度,；定期換水,；用淋病奈瑟菌監(jiān)測效果。
厭氧培養(yǎng)箱:二氧化碳10％,、氫氣10％,、氮?dú)?0％,每次使用時用厭氧指示劑監(jiān)測效果。
微生物標(biāo)本采集,、運(yùn)送與處理原則
標(biāo)本的正確采集,、運(yùn)送與處理對于細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定,，有著十分密切的關(guān)系,。

一、標(biāo)本采集
（1）送檢申請單必須惟一標(biāo)識,，并注樣品名稱,、型號、年月,、性狀,、標(biāo)本來源、采集時間,、檢驗(yàn)?zāi)康募疤砑游锸褂们闆r等,，以便實(shí)驗(yàn)室能針對該標(biāo)本選用相應(yīng)培養(yǎng)基和適宜培養(yǎng)環(huán)境，有利于對檢驗(yàn)結(jié)果的綜合評估,。
（2）為避免漏檢,，確保病原體的檢出，應(yīng)盡量在抗菌藥劑使用前采集標(biāo)本,。
（3）標(biāo)本采集時應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作,，減少或避免機(jī)體正常菌群及其他雜菌污染。
（4）以棉拭子采集標(biāo)本,，如拭子,，應(yīng)插入運(yùn)送培養(yǎng)基送檢。
（5）混有正常菌群的標(biāo)本,，如拭子,，不可置肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢。
（6）盛標(biāo)本容器須經(jīng)滅菌處理,，但不得使用消毒劑,。
（7）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定各種送檢標(biāo)本的采集、運(yùn)送,、保存等正確方法和注意事項(xiàng),，并應(yīng)向取樣者詳細(xì)介紹如何正確留取和送檢標(biāo)本。

二,、標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送至微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,。標(biāo)本采集后在室溫下超過2h未送達(dá)實(shí)驗(yàn)室者可視為不合格標(biāo)本,。生產(chǎn)線邊檢驗(yàn)可提高病原菌檢出率，送檢標(biāo)本必須與檢驗(yàn)申請單有相同的惟一標(biāo)識,。

三,、標(biāo)本驗(yàn)收
實(shí)驗(yàn)室只能接收和處理合格的檢驗(yàn)標(biāo)本，因此應(yīng)制定不合格標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn),；對不合格標(biāo)本應(yīng)注明原因,，退回，并做記錄,。
四,、標(biāo)本處理
（1）實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后，應(yīng)立即根據(jù)標(biāo)類型及檢驗(yàn)?zāi)康?，選擇合適的培養(yǎng)基接種,。

（2）混有正常菌群的標(biāo)本，應(yīng)作定量細(xì)菌培養(yǎng),。不能精確定量或常規(guī)定量操作較困難的標(biāo)本,，分離出致病菌及條件致病菌為優(yōu)勢菌時，應(yīng)作細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn),，同時注明細(xì)菌量化指標(biāo),。

（3）對已用抗菌藥物治療的標(biāo)本，可在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)以中和藥物對細(xì)菌的抑制作用
微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的采集
樣品在使用抗生素前,，將標(biāo)本采集在無菌容器內(nèi),，立即送到檢驗(yàn)科細(xì)菌室，特殊檢驗(yàn)應(yīng)先與細(xì)菌室聯(lián)系,，再按要求采集標(biāo)本,，并立即送檢。

（一）樣品的采集：
1.憑檢驗(yàn)申請單到檢驗(yàn)科領(lǐng)取血培養(yǎng)瓶,。
2.采取樣品部位和血培養(yǎng)瓶口應(yīng)嚴(yán)格消毒,。
3.通常一般至少作三次血培養(yǎng)，在抗菌藥已實(shí)施者,，更應(yīng)增加培養(yǎng)次數(shù),，懷疑特定菌種一般應(yīng)一日作三次培養(yǎng)，必要時需追加次數(shù),。
4.應(yīng)在生產(chǎn)高峰時采集,。
5.對疑為細(xì)菌性污染的產(chǎn)品，嚴(yán)格消毒后抽取2～3 ml作增菌培養(yǎng),。
6.每次采樣量5-10ml，培養(yǎng)基與樣品之比以10∶1為宜,，以稀釋樣品中的菌物質(zhì),。
7.采樣過程應(yīng)嚴(yán)格無菌操作,，避免污染。

培養(yǎng)基質(zhì)量控制
一,、配制時的質(zhì)量控制
（1）容器：配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶,、平皿或試管等器材應(yīng)為中性，無酸,、堿抑制物殘留,，平皿底部要平，以免瓊脂厚薄不一,，影響藥敏試驗(yàn)結(jié)果,。

（2）成分來源：各種成分來源可靠，不含對目的菌生長有抑制的物質(zhì),。特殊要求的培養(yǎng)基,，如葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)（O／F 試驗(yàn)），除加入葡萄糖外,，不能含有其他糖類,，指示劑不能用乙醇溶液，避免O／F試驗(yàn)的假陽性,。培養(yǎng)基配制用水應(yīng)是蒸餾水,。

（3）pH值調(diào)整：根據(jù)培養(yǎng)基的不同要求調(diào)整pH 值，控制在要求范圍的±0.2之內(nèi),。應(yīng)當(dāng)注意,，培養(yǎng)基在高壓滅菌后其pH 值降低0.1～0.2，故矯正時應(yīng)比實(shí)際需要p H值高0.1～0.2,。

（4）滅菌：根據(jù)培養(yǎng)基所含成分及配制數(shù)量的不同,，選擇不同的滅菌方式，既要達(dá)到滅菌效果,，又不破壞培養(yǎng)基成分,。一般對穩(wěn)定的培養(yǎng)基，如MH瓊脂,、營養(yǎng)瓊脂可用高壓滅菌,，即121℃15min ；而含糖的培養(yǎng)基則以108℃滅菌為好,，以防止糖類破壞,。不耐高熱的物質(zhì)如血清、牛乳等,，可采用間隙滅菌法滅菌,。

（5）分裝：根據(jù)使用的目的和要求決定分裝量。分裝培養(yǎng)基所用的平皿,、試管要求清潔,，不殘留酸堿,；制備平板培養(yǎng)基時，操作臺要水平,，以避免瓊脂平板厚薄不一,，同時確保無菌操作。

二,、配制后質(zhì)量控制
（1）培養(yǎng)基外觀情況：包括顏色,、透明度、有無沉淀和凝固,。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面有裂紋或與培養(yǎng)皿的邊緣分離,，說明培養(yǎng)基有脫水現(xiàn)象，必須丟棄,。

（2）無菌試驗(yàn)：每一批配好的培養(yǎng)基均須進(jìn)行無菌試驗(yàn),。先滅菌后分裝的培養(yǎng)基，可采用抽樣方法試驗(yàn),，少于100個樣本通常選取5％～10％的量,，如果配制大量培養(yǎng)基，則任意選取10 個培養(yǎng)基,；無菌分裝培養(yǎng)基則需全部做無菌試驗(yàn),。樣本在35 ℃ 或其他適宜的溫度下隔夜培養(yǎng)，如培養(yǎng)基含有血液,，則需再置于室溫1天,，以檢查嗜冷菌。選擇性培養(yǎng)基因含有抑制物質(zhì),，能抑制許多微生物,，因此，可加入10倍量的無菌液體培養(yǎng)基,，稀釋抑制物質(zhì),，以利于檢出污染菌。即使做過無菌試驗(yàn),，接種時,，也要檢查每個平板上的可見菌落。

（3）性能測試：每一批新制或新購的培養(yǎng)基,，使用前均須取已知性質(zhì)的庫存菌種進(jìn)行性能測試,。培養(yǎng)基按目的不同可分為增菌培養(yǎng)基、分離培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基,。

①增菌培養(yǎng)基：接種少量難以生長的細(xì)菌,，在一定時間內(nèi)觀察增菌情況，細(xì)菌能生長的最小接種濃度越小，說明增菌培養(yǎng)基性能愈好,。

②分離培養(yǎng)基：要求目的菌生長良好,，非目的菌被抑制。一般要求生長的目的菌接種量不可過多,，較好的方法是將測試菌調(diào)成0．5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海儆?.001ml的標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)涂劃在培養(yǎng)基上,，觀察菌落生長,。
③鑒定培養(yǎng)基：應(yīng)選擇具有典型特征的菌株作性能試驗(yàn)。如三糖鐵瓊脂,，須用弗勞地枸櫞酸桿菌,、福氏志賀菌及銅綠假單胞菌3種菌分別接種3支培養(yǎng)基，若反應(yīng)結(jié)果為斜面產(chǎn)酸／高層產(chǎn)酸,、硫化氫陽性,，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)酸，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)堿,，質(zhì)量才算合格,。
試劑、染色液和血清質(zhì)量控制

一,、試劑
各種試劑配好后,，均應(yīng)注明試劑名稱、配制日期,、有效期及配制者,，并作記錄，商品試劑亦應(yīng)注明購入日期及有效期,。配制好的試劑均應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)菌株作性能測試,，不合格者不能使用。性能測試間隔可根據(jù)試劑的穩(wěn)定性和使用頻率而定,，如氧化酶試劑每天用前測試,，靛基質(zhì)試劑每周測試1 次。試劑須根據(jù)不同要求作適當(dāng)?shù)馁A存,，如氧化酶試劑應(yīng)置棕色瓶中4 ℃冰箱保存,。

二、染色液
常用染色液如革蘭染色液在每次配制后并常規(guī)至少每周檢測1次,，用標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌（ATCC25923）和大腸埃希菌（ATCC 25922）作陽性和陰性檢測,。不常用染色液（如鞭毛染色液）應(yīng)于每次使用前，用已知特征的菌株作檢測,。
3.診斷血清
診斷血清的使用和保存必須按說明要求執(zhí)行,，一般置4℃冰箱貯存，且不得暴露室溫過久；使用前應(yīng)注意有效期及效價,，第一次使用抗血清時應(yīng)用相應(yīng)的菌株檢查其有效性,，以后每月檢測1次。如抗血清出現(xiàn)任何顏色的改變或混濁,，即不能使用,。

微生物檢驗(yàn)標(biāo)本及檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制
一、微生物檢驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量控制
正確采集和處理標(biāo)本是實(shí)驗(yàn)室檢查獲得正確結(jié)果的前提,，目前仍有不少實(shí)驗(yàn)室和檢驗(yàn)人員對檢驗(yàn)標(biāo)本分析前質(zhì)量控制的重視不夠,。對標(biāo)本采集方法和時間、標(biāo)本來源,，實(shí)驗(yàn)室人員雖然不能直接控制,，但有責(zé)任人員正確采集標(biāo)本，可采取集中講課,、個別輔導(dǎo)作取標(biāo)本示教等方式給予指導(dǎo),。同時控制影響檢驗(yàn)質(zhì)量的其他因素，如檢驗(yàn)標(biāo)本的運(yùn)送,、儲存和處理等,，均應(yīng)統(tǒng)一按正確的操作規(guī)程執(zhí)行。

二,、微生物檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制
1.檢驗(yàn)結(jié)果報告
微生物學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果報告單是反映微生物學(xué)檢驗(yàn)水平的重要依據(jù)之一,。報告單填寫要準(zhǔn)確、規(guī)范,，將微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)上的新進(jìn)展充分反映在報告單上,，如細(xì)菌名的更改，新的耐藥原因?qū)е碌乃幟艚Y(jié)果修正等,。每一份報告單發(fā)出前都要由專人審核,，包括檢查項(xiàng)目是否遺漏、結(jié)果有無明顯錯誤,、字跡是否清楚,、檢驗(yàn)者有無蓋章簽名等。核對后蓋上審核章,，才能將報告單正式發(fā)出,。同時，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)實(shí)行分級報告制度,，將標(biāo)本顯微鏡檢查的初級結(jié)果報告生產(chǎn)部門,，并進(jìn)行初級試驗(yàn)，為早期解決質(zhì)量問題提供依據(jù),。

2.檢驗(yàn)結(jié)果記錄
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定實(shí)驗(yàn)結(jié)果登記制度和原始記錄,，包括取樣資料,，細(xì)菌的分離、鑒定及培養(yǎng)結(jié)果,，培養(yǎng)基和試劑的配制記錄,。以備產(chǎn)品檢驗(yàn)報告單遺失或結(jié)果有疑問時查考。詳細(xì)的結(jié)果記錄,，有利于定時統(tǒng)計(jì),、分析和總結(jié)產(chǎn)品感染菌的類型及其他情況，及時通報其他部門,，指導(dǎo)生產(chǎn)原料的使用和采購,。